Anti-β-Actin抗體（鼠單抗）
Anti-β-Actin Antibody（Monoclonal Antibody from Mouse）
|
產(chǎn)品編號(hào)
|
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
|
RGA2030
|
Anti-β-Actin抗體（鼠單抗）
|
20 μl
|
● 產(chǎn)品簡介
|
來源
|
用途及稀釋比例
|
抗體類型
|
β-Actin分子量
|
|
Mouse
|
WB 1:5000-10000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
|
單克隆抗體
|
~45 kD
|
注：WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF,
Immunofluorescence
Actin抗體用經(jīng)過適當(dāng)修飾的人工合成β-actin N-terminal一段多肽作為抗原制備而成的抗β-actin小鼠單克隆抗體。本Actin抗體在Western blot或免疫染色時(shí)僅識(shí)別β-actin。注意：本抗體不能用于檢測成年動(dòng)物心肌或骨骼肌的β-actin。
Actin即肌動(dòng)蛋白，是細(xì)胞的一種重要骨架蛋白，在細(xì)胞分泌、吞噬、locomotion、cytoplasmic、streaming和cytokinesis等過程中起重要作用。Actin大致可分為六種，其中四種是不同肌肉組織特異性的，包括α-skeletal muscle actin，α-cardiac muscle actin，α-smooth muscle actin，和γ-smooth muscle actin；另外兩種廣泛分布于各種組織中，包括β-actin(β-non-muscle)和γ-non-muscle actin。不同的actin之間同源性大于90%，但在N-terminal同源性僅50%-60%，因此N-terminal常被用作actin的抗原。
β-actin的蛋白水平通常不會(huì)發(fā)生改變，因此被廣泛用于WB時(shí)上樣量是否一致的參照，也常被用于免疫染色觀察細(xì)胞的微絲結(jié)構(gòu)。在用作WB的參照時(shí)，Actin抗體和Tubulin抗體的主要不同之處在于兩者所識(shí)別蛋白的分子量不同，這樣可以選擇合適的參照在同一張膜上實(shí)現(xiàn)同時(shí)檢測目標(biāo)蛋白和參照蛋白。
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測，至少可以檢測20次。
● 貯存形式：
2 mg/ml抗體溶于PBS，50%甘油，pH7.2。
● 保存及運(yùn)輸條件：
-20℃保存，一年有效；避免反復(fù)凍融；濕冰運(yùn)輸。
● 使用說明：
1. Western Blot雜交(ECL顯色)：1:5000-10000稀釋，常溫孵育1-2 h或4℃過夜。
2. 免疫熒光（IF）和免疫組化（IHC）：1:200-1000稀釋。
● 實(shí)驗(yàn)示例：
樣品：K562細(xì)胞,SDS裂解液（貨號(hào)：RL1060）提取總蛋白；
電泳：RTD6117 4-20% RealPAGE預(yù)制膠
轉(zhuǎn)膜：NC膜，1×RealBlot快速轉(zhuǎn)膜液快轉(zhuǎn)400 mA 30 min
封閉：Western封閉液I（BSA）封閉60min
一抗：Anti-β-Actin抗體（鼠單抗）（貨號(hào)：RGA2030）
1:10000 RT 60min；
二抗：HRP標(biāo)記羊抗鼠IgG（貨號(hào)：HGM1060） 1:5000 RT 60min；
檢測：RealECL發(fā)光液（貨號(hào)：EC2520）自動(dòng)曝光1秒
