精準定量1kb DNA Ladder

● 產品編號及規(guī)格：

    RTM417-02       100T(2×250μl)

● 產品簡介：

    本產品是由8條帶狀雙鏈DNA條帶組成，適用于瓊脂糖凝膠電泳中DNA條帶的分析。

本產品為即用型產品，已含有1×loading buffer，可根據實驗需要，直接取2-5μl電泳，使用方便，電泳圖像清晰。本產品中8條帶分為1000（50 ng/5 μl），2000（50 ng/5 μl），3000（50 ng/5 μl），4000（100 ng/5 μl），5000（50 ng/5 μl），6000（50 ng/5 μl），8000（50 ng/5 μl），10000bp（50 ng/5 μl）。其中4000bp條帶加亮顯示。

● 儲存及運輸：

4℃貯存3個月， -20℃長期貯存；常溫運輸。

● 使用方法：

1. 取2-5μl本產品加入到瓊脂糖凝膠的加樣孔中（每1mm×1mm加樣孔加1μl，如果加樣孔寬于5mm，可以適當增加上樣量）就行電泳。

2. 建議電泳條件:凝膠濃度為0.8-1.0％，凝膠長度10 cm，電泳電壓~7v/cm，電泳時間60+分鐘。

3. 通過核酸染料染色后紫外燈或藍光儀下觀察條帶。

● 注意事項：

1. 瓊脂糖的質量對DNA的電泳有很大影響，電泳時請盡量使用質量優(yōu)等的瓊脂糖。由于PAGE電泳的特殊性，該產品不建議用于PAGE電泳。

2. 使用與電泳緩沖液一致的緩沖液融化瓊脂糖，例如使用1×TAE緩沖液電泳，需使用1×TAE緩沖液溶膠。

3. 多次電泳后緩沖液電導增強，相同電壓下電流增大，導致分辨率降低，并且明顯產熱，嚴重時會引起凝膠熔化或DNA變性。

4. 推薦使用RealSafe系列染料（貨號：GR002，GR003，GR004）染色。如果使用Goldview或EB等染料進行染色，由于此類染料帶更多的正電荷（染料移動方向與核酸泳動方向相反），隨著電泳時間延長，染料向大片段聚集，凝膠會出現陰陽膠現象（染料含量高的凝膠紫外下較亮，含量低的凝膠紫外下發(fā)暗），導致小分子量DNA顯色很弱或不可見。陰陽膠可以在電泳結束后浸泡染色，將膠浸沒在含1 μg /ml EB或Goldview的電泳緩沖液中20-25 min，小分子量DNA會顯色清楚。更長時間浸泡會因DNA分子擴散而使條帶彌散，小分子量DNA更易彌散。

5. 紫外照射下EB易分解，使DNA條帶熒光變淺。DNA受紫外光照射形成嘧啶二聚體，不利于待回收片段的下游工作，因此盡可能減少紫外照射時間。

6. 蔗糖會結合DNA，降低其電泳遷移率，建議DNA樣品上樣使用含甘油的Loading Buffer。

7. 大部分核酸工具酶會結合DNA，降低其電泳遷移率，大分子量DNA尤為明顯。

● 實驗示例：

● 附錄：

DNA在瓊脂糖凝膠中的有效分離范圍

使用RTM417  1kb DNA ladder產品發(fā)表部分文章列表：

1. [2023 IF=4.9] Degradation of Natural Undaria pinnatifida into Unsaturated Guluronic Acid Oligosaccharides by a Single Alginate Lyase.

Marker :RTM417，1kb DNA ladder

Author: Hui Wang, Jiaqi Wen, Nuraliya Ablimit, Kun Deng, Wenzhuo Wang and Wei Jiang

Journal: Marine Drugs 2024, 22,453.

Institution：College of Biological Sciences, China Agricultural University

Paper link：https://doi.org/10.3390/md22100453